16강 / 20강
Table S4 를 읽는다 — 항체 열넷과 네 경로
SI Table S4 「Antibodies used for western blot analysis」
논문 Table S4 에는 항체 열넷이 있습니다. 그런데 아무렇게나 모아 놓은 것이 아니에요. 경로별로 묶입니다.
| 경로 | 항체 | Fig. S9 |
|---|---|---|
| Wnt | β-catenin | 패널 A |
| Jak-Stat3 | p-JAK1 · JAK1 · p-JAK2 · JAK2 · p-STAT3 · STAT3 | 패널 B |
| NF-κB | p-p65 · p65 | 패널 C |
| Myc | cMYC · cMYC/N-MYC | 패널 D |
| 면역회피 | CD47 · CD38 | 패널 B · C |
| 로딩대조군 | GAPDH | 모든 패널 |
이 목록이 곧 논문의 가설입니다 — "DDX54 가 Wnt · Jak-Stat3 · NF-κB · Myc 을 켜서 CD38 · CD47 을 올린다."
그리고 Fig. S9 의 네 패널이 그 네 경로와 정확히 대응합니다.
항체를 고를 때 확인하는 것
| 확인할 것 | 왜 |
|---|---|
| 종 반응성 | 마우스 단백질에 듣나 · 사람에도 듣나 — LLC1 과 A549 둘 다 써야 한다 |
| 용도 | WB 용인가 · IHC 용인가 · 유세포용인가 — 같은 표적이어도 다르다 |
| 단클론/다클론 | 단클론은 특이적이고 일정, 다클론은 신호가 세지만 로트마다 다름 |
| 검증 자료 | 넉다운 세포에서 밴드가 사라지는지 — 가장 강한 검증 |
마지막 줄이 중요합니다. 이 논문은 Ddx54 넉다운 세포를 갖고 있으니, DDX54 항체를 그 세포에서 돌려 밴드가 사라지면 항체가 진짜라는 증거가 됩니다.
논문이 카탈로그 번호를 적어 두는 것도 이 때문이에요 — 같은 항체를 남이 살 수 있어야 재현이 됩니다.
🤔 확인 문제
논문이 항체의 회사와 카탈로그 번호를 표로 싣는 가장 큰 이유는?
해설 항체는 회사·클론·로트마다 성능이 다릅니다. 'anti-STAT3 를 썼다' 만으로는 재현할 수 없어요.