Lesson 9 of 20
얼마나 찼나 — %hCD45 라는 자
hCD45 / (hCD45 + mCD45) · 12주 25% 라는 문턱
세포를 넣었습니다. 잘 들어갔을까요? 이 물음에 답하는 자가 %hCD45 입니다.
CD45 는 모든 백혈구가 지닌 표지입니다. 적혈구에는 없어요. 사람 CD45 를 알아보는 항체와 마우스 CD45 를 알아보는 항체를 함께 써서 피 한 방울 안의 백혈구를 둘로 나눕니다.
%hCD45 = hCD45⁺ / (hCD45⁺ + mCD45⁺) × 100
분모가 전체 세포가 아니라 백혈구라는 점이 중요합니다. 적혈구와 부스러기는 빼고 셉니다.
THRESH 를 바꿔 보세요. 통과하는 마리 수가 달라집니다 — 그래서 미리 정해 두어야 합니다.
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어디서 잰 %hCD45 인가
같은 마우스라도 재는 곳에 따라 값이 다릅니다.
| 조직 | 대체로 | 메모 |
|---|---|---|
| 말초혈 | 기준값 | 살아 있는 채로 반복해서 잴 수 있는 유일한 곳 |
| 비장 | 말초혈보다 높다 | 부검 때만 잰다 |
| 골수 | 가장 높다 | 씨앗이 사는 곳 |
| 흉선 | T세포만 | T세포가 만들어지고 있는지 보는 자리 |
그래서 논문을 읽을 때 "생착률 40%" 라는 문장은 어디서 쟀는지를 함께 봐야 합니다. 비장에서 잰 40% 와 말초혈에서 잰 40% 는 다른 마우스입니다.
피 한 방울로 여러 번 재기
말초혈은 살아 있는 채로 잴 수 있습니다. 그래서 4주 · 8주 · 12주로 같은 마우스를 따라가며 잽니다.
안와후방 채혈이나 복재정맥 채혈로 50–100 µL 를 뽑아 적혈구를 터뜨리고 항체로 염색하면 됩니다. 같은 마우스를 반복해서 보면 마리 사이의 차이와 시간에 따른 변화를 나눠 볼 수 있어요.
🤔 Check yourself
%hCD45 를 계산할 때 분모로 알맞은 것은?
Answer 적혈구·부스러기·죽은 세포는 분모에서 빼야 합니다. 백혈구끼리 견주는 비율이라야 "사람 피가 마우스 피를 얼마나 밀어냈는가" 라는 물음에 답합니다.
🤔 Check yourself
실험을 끝내고 결과를 본 뒤, 생착 문턱을 25% 에서 15% 로 낮춰 마우스 세 마리를 되살렸습니다. 무엇이 문제일까요?
Answer 포함·제외 규칙은 결과를 보기 전에 정하는 것입니다. 결과를 본 뒤 문턱을 움직이면 원하는 답이 나올 때까지 고를 수 있게 되고, 통계는 그 사실을 모릅니다.