6강 / 20강

사람 세포 구하기 — 제대혈과 동원 말초혈

CD34⁺ 분리 · 순도 90% · 공여자는 시료가 아니라 블록이다

인간화 마우스의 출발점은 마우스가 아니라 사람입니다. 누구의 세포를 넣느냐가 그 마우스의 면역계를 정합니다.

쓸 수 있는 원천은 크게 둘입니다.

	제대혈	동원 말초혈
공여자	신생아(분만 후 버려지는 혈액)	성인(G-CSF 로 줄기세포를 피로 불러낸 뒤 채혈)
CD34⁺ 수	1–5 ×10⁶ / 1건	100–500 ×10⁶ / 1인
생착	가장 좋다	조금 낮다
만들 수 있는 마우스	수 마리 ~ 수십 마리	수백 마리
HLA 고르기	은행에서 형을 골라 받기 쉽다	공여자 개인에 매인다

제대혈이 어린 세포라 잘 자랍니다. 대신 한 건에서 나오는 양이 적어요. 같은 유전배경으로 많은 마우스를 만들어야 하는 큰 실험은 동원 말초혈을 씁니다.

고등학생사람 세포 구하기

공급원	내용	특징
제대혈	출산 시 탯줄에서	CD34⁺가 풍부 · 미성숙 · 양이 적음
동원 말초혈	G-CSF로 골수에서 끌어냄	양이 많음 · 성인 · 동의 필요
골수	직접 채취	침습적

제대혈이 가장 흔합니다 — 어차피 버려지는 것이고 세포가 젊어요.

CD34 를 골라 내는 일

혈액에는 온갖 세포가 섞여 있습니다. 그중 CD34 를 표면에 지닌 세포가 조혈모세포와 그 바로 아래 전구세포예요.

자기비드에 붙은 항-CD34 항체로 붙잡아 자석으로 걸러 냅니다. 목표는 순도 90% 이상입니다.

순도가 낮으면

섞여 들어간 성숙 T세포가 문제입니다.
씨앗을 뿌린 줄 알았는데 hu-PBL 을 함께 넣은 셈이 되어 이른 GvHD 가 옵니다.

순도가 높으면

넣은 것이 씨앗뿐입니다.
T세포는 마우스 흉선에서 새로 만들어집니다.

고등학생CD34⁺ 분리

혈액에서 조혈모세포만 골라내야 합니다. CD34가 그 표지자예요.

단계	내용
1	단핵세포 분리 (밀도 구배)
2	CD34 항체가 붙은 자성 비드로 표지
3	자석 컬럼에 통과 — CD34⁺만 붙음
4	순도 확인 — 90% 이상 목표

순도가 낮으면 성숙 T세포가 섞여 GvHD가 빨리 옵니다 (14강).

공여자를 늘리면 관측된 흩어짐이 커집니다. 그 커짐이 <b>진짜</b>입니다.

Python 브라우저에서 실행

# 공여자 하나로 몰 것인가, 여럿에 나눌 것인가
import numpy as np

rng = np.random.default_rng(7)
n_mice = 24

def experiment(n_donors, donor_sd=8.0, mouse_sd=5.0):
    per = n_mice // n_donors
    donor_effect = rng.normal(0, donor_sd, n_donors)
    vals = []
    for d in range(n_donors):
        vals.append(donor_effect[d] + rng.normal(0, mouse_sd, per))
    return np.concatenate(vals)

for k in (1, 2, 4, 8):
    v = experiment(k)
    se = v.std(ddof=1) / np.sqrt(n_mice)
    print("공여자", k, "명 -> 관측 표준편차", round(v.std(ddof=1), 1),
          "| 순진하게 계산한 표준오차", round(se, 2))

print()
print("공여자 1명일 때 표준오차가 작아 보이는 것은 착시다.")
print("그 실험은 사람 한 명을 본 것이므로, 사람 사이의 차이를 아예 재지 못했다.")

고등학생공여자는 시료가 아니라 블록이다

이것이 이 강의의 핵심 통찰 중 하나입니다.

흔한 오해	실제
공여자는 그냥 재료	공여자가 실험의 변수
마우스 수가 반복수	공여자 수가 진짜 반복수

같은 공여자에서 나온 마우스들은 서로 독립이 아닙니다 — 18강의 통계 문제입니다.

공여자에 붙는 꼬리표

실험 노트에 반드시 남겨야 하는 것들입니다. 나중에 결과가 갈릴 때 이 표가 없으면 왜 갈렸는지 영영 모릅니다.

HLA 형 — 13강의 HLA 계통을 쓸 때 반드시 맞춰야 합니다
원천 — 제대혈인가 동원 말초혈인가
CD34⁺ 순도와 넣은 세포 수
동결 여부 — 얼렸다 녹인 세포는 생착이 떨어집니다
기증 동의와 IRB 승인 번호

고등학생공여자 정보에 무엇을 적나

항목	왜
공여자 ID	18강 — 블록으로 다루려면
HLA 형	13·15강 — 종양과 맞출지
CD34⁺ 순도와 수	생착에 영향
채취·동결 조건	생존율
연령·성별	변이 요인

HLA 형을 적는 이유가 13강에 있습니다.

🤔 확인 문제

CD34⁺ 순도가 70% 로 낮게 나왔습니다. 가장 걱정할 일은 무엇일까요?

🤔 확인 문제

한 공여자의 세포로 마우스 20마리를 만들어 두 군으로 나눠 실험했습니다. 이 실험이 말할 수 없는 것은?