Lesson 5 of 20
리포펙션 — 지질 방울에 실어 막을 통과시킨다
SI 「Transfections into LLC1 cells were carried out using Lipofectamine RNAiMAX」
siRNA 를 배지에 그냥 넣으면 어떻게 될까요? 거의 안 들어갑니다.
이유는 전하입니다.
RNA 인산기 (−) ⟷ (−) 세포막 인지질
둘 다 음전하라 서로 밀어냅니다. 게다가 RNA 는 물에 잘 녹는 큰 분자라 지질막을 통과할 수 없어요.
리포펙션은 이 문제를 이렇게 풉니다.
1. 양전하를 띤 지질을 siRNA 와 섞는다
2. 양전하 지질이 음전하 RNA 를 감싼다 → 지질 방울(리포플렉스)
3. 방울 겉면은 이제 양전하 — 음전하 세포막에 끌린다
4. 세포가 방울을 삼킨다 (엔도사이토시스)
5. 방울이 터지며 siRNA 가 세포질로 풀린다
논문이 쓴 RNAiMAX 는 siRNA 전용으로 만들어진 시약입니다 — 작은 RNA 를 효율 좋게 실어 나르도록 조성이 맞춰져 있어요.
모형 곡선입니다. 보려는 것은 '가운데 어딘가가 최적' 이라는 모양입니다.
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siRNA 를 배지에 그냥 넣으면 세포에 잘 들어가지 않는 이유는?
Answer 전하와 물성 둘 다 문제입니다. 그래서 양전하 지질로 감싸 전하를 뒤집고, 세포가 삼키게 만듭니다.