유박사의 mRNA 즉석 합성기 첫걸음 I

DNA 를 넣으면
백신이 나온다

62.5 × 50.0 × 32.5 cm. 큰 프린터만 한 상자입니다. 왼쪽에 DNA 주형 4.8 ng 을 넣고 여덟 시간 뒤 오른쪽에서 지질나노입자에 싸인 mRNA 300 µg 을 받습니다.
그 사이에 여섯 걸음이 있습니다 — PCR · 시험관 전사 · DNA 소화 · poly(A) 꼬리 · 정제 · 포장. 스무 강이 그 여섯을 하나씩 뜯습니다. 왜 rGTP 만 굶기는지, 왜 자석이 원심분리기를 대신하는지, 왜 “상용기의 70%” 라는 숫자를 조심해서 읽어야 하는지까지.
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🐍 Python🧬 IVT🧲 자성 비드 🌡️ 펠티에💊 LNP🦠 RBD🇰🇷 한국어
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이렇게 배웁니다

📦여섯 걸음이 전부다

PCR · 전사 · 소화 · 꼬리 · 정제 · 포장. 스무 강이 이 여섯을 하나씩 뜯습니다.

🔢숫자는 논문의 숫자

4.8 ng · 1.875 mM · 111.1 nm · 308 µg. 지어낸 값은 없고, 논문에 없는 것은 가정이라고 적습니다.

🚫안 잰 것을 적어 둔다

캡핑 효율 · 잔류 DNA · dsRNA. 이 논문이 재지 않은 것을 20강에서 표로 남깁니다.

🛠️만지며 익히기

강마다 실험실 위젯이 하나씩 — 사이클 수 · 캡 비율 · 유량비를 직접 밀어 결론이 어떻게 뒤집히는지 봅니다.

전체 커리큘럼

01
상자 하나에 DNA 를 넣으면 백신이 나온다
Wei 2023 · Fig. 1a — “template-in, vaccines-out”
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02
여섯 걸음 — 무엇이 들어가고 무엇이 나오는가
Wei 2023 · Fig. 1a 를 왼쪽에서 오른쪽으로
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03
주형 — T7 프로모터 · UTR · 그리고 가운데 글자
Wei 2023 · Results “System design” — 서열이 바뀌어도 공정은 그대로
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04
PCR — 4.8 ng 을 불린다
Wei 2023 · Experimental section “PCR” · Fig. 3c
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05
PCR 모듈 — 받침 먼저, 액체 나중
Wei 2023 · Fig. 3a·3b — 1.8 °C/s 승온 · 2.6 °C/s 냉각
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06
자성 비드 — 원심분리기 없이 건져 올린다
Wei 2023 · Experimental section · Fig. 4c·4d
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07
시험관 전사 — rGTP 만 왜 8분의 1인가
Wei 2023 · Experimental section “IVT”
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08
캡 — 없으면 세포가 “남의 것” 으로 본다
Wei 2023 · Experimental section — 캡 유사체 0.375 mM
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09
HMM 모듈 — 데우고 · 붙잡고 · 섞는다
Wei 2023 · Fig. 4a·4b·4c — 30 °C 에서 ±0.5 °C · 자석 90초
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10
DNase — 주형을 지운다
Wei 2023 · Experimental section — RQ1 RNase-free DNase 10 U, 37 °C 15분
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11
poly(A) 꼬리 — 150 염기 이상, 그리고 낚싯바늘
Wei 2023 · Experimental section — E-PAP 40 U · MnCl₂ 2.5 mM · 37 °C 1시간
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12
정제 — oligo d(T) 로 꼬리를 낚는다
Wei 2023 · Experimental section — LiCl 1.6 M · 65 °C 5분 · 두 번 세척
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13
잰다 — 308 · 198 · 324 µg
Wei 2023 · Fig. 4e — Agilent 2100 Bioanalyzer · RNA 6000 ladder
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14
포장 — 에탄올과 물이 만나는 그 한 점
Wei 2023 · Fig. 5a — SHM 칩 · 지질 300 : mRNA 900 µL/min
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15
111.1 nm · PDI 0.203 — 두 기계가 서로를 받쳐 준다
Wei 2023 · Fig. 5b(DLS) · Fig. 5c(TEM)
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16
eGFP — 먼저 초록으로 확인한다
Wei 2023 · Fig. 5d — HEK-293T · 3×10⁵ cells/well · 1 µg/well · 24시간
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17
RBD 백신 — 가운데 글자만 갈아 끼운다
Wei 2023 · Fig. 6a·6b·6c — SP 1–14 · RBD 319–541 · GenBank NC_045512
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18
상용기의 70% — 이 숫자를 어떻게 읽을 것인가
Wei 2023 · Fig. 6d·6e — 프로토타입 vs PNI vs MOCK
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19
워크플로 파일 — 공정을 글로 적는다
Wei 2023 · Fig. 1b · Fig. 2b · Fig. S2·S3 — 밸브 6 · 펌프 7 · 저장통 11
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20
말할 수 있는 것과 말할 수 없는 것
Wei 2023 전체 — 그리고 II권으로 넘기는 물음 넷
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