Lesson 8 of 20
산란광 — 물들이지 않아도 알 수 있는 것
SI 「BD LSRFortessa X-20」 · FSC 와 SSC
형광항체를 하나도 안 붙여도, 세포가 레이저 앞을 지나가면 알 수 있는 것이 둘 있습니다.
이 둘만으로도 세포 종류가 어느 정도 갈립니다.
| 세포 | FSC (크기) | SSC (복잡함) |
|---|---|---|
| 림프구 | 작다 | 낮다 — 속이 단순하다 |
| 단핵구 | 중간 | 중간 |
| 호중구 | 중간 | 높다 — 알갱이가 많다 |
| 부스러기 | 아주 작다 | 아주 낮다 |
FSC-A 와 FSC-H 의 차이가 이중체를 가르는 열쇠입니다.
세포 하나가 레이저를 지날 때 신호는 산봉우리 모양이 됩니다. 봉우리의 높이(H) 와 넓이(A) 는 세포 하나일 때 일정한 비를 갖습니다.
그런데 두 개가 붙어 지나가면 — 봉우리가 길게 늘어집니다. 높이는 그대로인데 넓이만 커져요.
단일체: A ∝ H 이중체: A ≫ H
그래서 FSC-A 대 FSC-H 를 그리면 단일체는 대각선 위에 모이고, 이중체는 대각선 아래(오른쪽) 로 벗어납니다. 그것을 잘라 냅니다.
A/H 비가 이중체에서 커지는 것을 확인해 보세요. 게이팅은 이 비를 자릅니다.
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FSC-A 대 FSC-H 산점도에서 대각선 아래로 벗어난 점들은 무엇일까요?
Answer 이중체는 봉우리가 길게 늘어져 넓이(A)만 커지고 높이(H)는 그대로입니다. 그래서 A/H 비가 커지고, 대각선에서 벗어나요.