1강 / 20강
방법 문단은 화학 처방전이다
SI 「Western blot analysis」한 줄을 통째로 해부한다
논문 부록에서 가장 짧은 문단 하나를 가져옵니다.
For cell lysis, we used a lysis buffer containing 20 mM HEPES (pH 7.2),
150 mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 10% glycerol, and 0.1% SDS.
This buffer was supplemented with 0.1% of phosphatase inhibitor cocktail.
두 문장입니다. 그런데 여섯 가지 결정이 들어 있어요. 다르게 정했으면 결과가 달라졌을 결정들입니다.
| 성분 | 무슨 일 | 빼면 | 강 |
|---|---|---|---|
| 20 mM HEPES pH 7.2 | pH 를 붙잡는다 | 단백질이 변성될 수 있다 | 3강 |
| 150 mM NaCl | 이온세기를 준다 | 비특이 결합이 남는다 | 4강 |
| 0.5% Triton X-100 | 막을 녹인다 | 세포가 안 깨진다 | 6강 |
| 10% 글리세롤 | 단백질을 안정시킨다 | 보관 중 활성이 준다 | 7강 |
| 0.1% SDS | 남은 결합을 푼다 | 덜 풀린 덩어리가 남는다 | 6·8강 |
| 탈인산화효소 억제제 | 인산기를 지키다 | p-STAT3 띠가 사라진다 | — |
이 20강의 뼈대
🤔 확인 문제
논문의 용해 완충액에 탈인산화효소 억제제를 넣은 이유는?
해설 세포를 깨면 탈인산화효소도 풀려나와 인산기를 뗍니다. 그러면 실제로는 켜져 있던 STAT3 가 웨스턴에서 안 보여요 — 결론이 뒤집힙니다.