Lesson 7 of 20

피하주사 — 10만 개와 50만 개는 왜 다른가

SI 「1x10^5 cells (LLC1) or 5x10^5 cells (KLN205) ... injected subcutaneously」

논문이 적은 그대로입니다.

For cell administration, 1x10^5 cells (LLC1) or 5x10^5 cells (KLN205)
suspended in 100µl of phosphate-buffered saline (PBS) were injected
subcutaneously into the dorsal region.

LLC1 은 10만 개, KLN205 는 50만 개. 다섯 배 차이입니다. 왜 다를까요?

LLC1 — 10만 개

빨리 자란다.
많이 넣으면 관찰하기 전에 종말점에 닿는다

KLN205 — 50만 개

천천히 자란다.
적게 넣으면 아예 자리를 못 잡는 마우스가 생긴다

세포 수는 "많을수록 확실" 한 값이 아닙니다. 3주쯤에 네 군의 차이가 가장 잘 보이도록 맞추는 값이에요. 그 값은 세포주마다 예비실험으로 찾습니다.

High school10만 개와 50만 개는 왜 다른가

세포주	주사 세포 수
LLC1	1×10⁵ (10만)
KLN205	5×10⁵ (50만)

세포주마다 종양을 만드는 능력이 다릅니다. 빨리 자라는 것은 적게, 느린 것은 많이 넣어요.

목표는 같은 시기에 비슷한 크기가 되게 하는 것입니다.

High school세포 수가 실험 기간을 정한다

세포 수	결과
너무 적음	종양이 안 생기거나 늦게 — 실험이 길어짐
적절	2~3주에 측정 가능한 크기
너무 많음	너무 빨리 자람 — 치료 시간이 없음

치료 효과를 보려면 약이 작용할 시간이 있어야 합니다.

실제로 벤치에서 하는 계산입니다. 여유배수를 빼먹으면 마지막 마우스에 넣을 것이 없습니다.

Python Runs in your browser

# 주사할 세포 현탁액 만들기 — 마우스 7마리에 LLC1 1x10^5 개씩
마리수      = 7
마리당세포  = 1e5
마리당부피  = 100      # µl
여유배수    = 1.3      # 주사기·팁에 남는 양을 감안해 넉넉히 만든다

필요세포 = 마리수 * 마리당세포 * 여유배수
필요부피 = 마리수 * 마리당부피 * 여유배수      # µl

print(f"필요한 세포   {필요세포:,.0f} 개")
print(f"만들 현탁액   {필요부피:,.0f} µl  ({필요부피/1000:.2f} ml)")
print(f"농도          {필요세포/필요부피*1000:,.0f} 개/ml")
print()

# 세포를 센 결과가 2.4 x 10^6 개/ml 이었다면, 몇 µl 를 덜어 쓰고 PBS 를 얼마나 더할까
센농도 = 2.4e6        # 개/ml
덜어낼부피 = 필요세포 / 센농도 * 1000          # µl
더할PBS   = 필요부피 - 덜어낼부피
print(f"세포 현탁액에서 {덜어낼부피:,.0f} µl 를 덜어 내고")
print(f"PBS {더할PBS:,.0f} µl 를 더하면 됩니다.")

High school피하주사의 요령

요령	왜
옆구리에	움직임에 방해가 적음 · 측정이 쉬움
피부를 집어 올려	피하 공간을 확보
부피 100 µl 정도	—
차갑게 유지	세포 생존
잘 섞어 균일하게	세포가 가라앉음

마지막 줄이 중요합니다 — 안 섞으면 나중 마우스에 세포가 적게 들어갑니다.

High school피하 이식의 한계

한계	내용
원래 장기가 아님	폐암인데 피부 밑에
미세환경이 다름	기질 · 혈관 · 면역세포 구성
전이를 못 봄	대개 국소에 머묾

대신 측정이 쉽습니다 — 캘리퍼로 매일 잴 수 있어요.

원래 장기에 넣는 동소이식(orthotopic)이 더 실제에 가깝지만, 측정하려면 영상 장비가 필요합니다.

🤔 Check yourself

KLN205 에 LLC1 과 같은 10만 개를 넣으면 가장 일어나기 쉬운 일은?