Lesson 7 of 20

세포를 센다 — 혈구계산판의 아홉 칸

논문의 「1×10^5 cells」 는 어떻게 세어 나온 값인가

/invivo 7강에서 "LLC1 을 1×10⁵ 개 주사했다" 는 문장을 봤습니다. 그 10만 개를 어떻게 셌을까요.

가장 고전적인 방법이 혈구계산판(hemocytometer) 입니다. 유리판에 홈이 파여 있어서, 커버글라스를 덮으면 부피가 정확히 정해진 공간이 생깁니다.

📏

큰 칸 하나

1 mm × 1 mm × 0.1 mm 깊이

💧

그 부피

0.1 mm³ = 10⁻⁴ ml

✖️

그래서

센 개수 × 10⁴ = 개/ml

깊이 0.1 mm 가 핵심입니다. 그 덕분에 10⁴ 을 곱하면 ml 당 개수가 나와요. 이 숫자가 계산을 아주 단순하게 만듭니다.

High school혈구계산판의 아홉 칸

세포 수를 세는 고전적인 도구입니다. 유리판에 격자가 새겨져 있고, 깊이가 정해져 있어요.

구조	값
큰 칸 하나의 넓이	1 mm²
덮개유리까지의 깊이	0.1 mm
큰 칸 하나의 부피	0.1 mm³ = 0.1 µl

부피를 알기 때문에 세면 농도가 나옵니다.

High school계산 공식

세포/ml = (큰 칸 평균 세포 수) × 10⁴ × 희석배수

10⁴이 나오는 이유는 이렇습니다. 0.1 µl에 든 수를 셌으니 1 ml(=1000 µl)에는 10,000배가 들어 있어요.

예	계산
네 칸 평균 50개, 2배 희석	50 × 10⁴ × 2 = 1×10⁶ 세포/ml

보통 네 모서리 큰 칸을 세어 평균을 냅니다. 한 칸만 세면 불균일할 때 틀려요.

실제 벤치에서 하는 계산 그대로입니다.

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# 혈구계산판 계산 — 네 귀퉁이 큰 칸을 세고 평균낸다
칸들 = [82, 95, 76, 91]          # 큰 칸 네 개에서 센 개수
희석배수 = 2                      # 트리판블루와 1:1 로 섞었다

평균 = sum(칸들) / len(칸들)
농도 = 평균 * 1e4 * 희석배수      # 개/ml

print(f"센 값      {칸들}")
print(f"평균       {평균:.1f} 개/칸")
print(f"농도       {농도:,.0f} 개/ml  ({농도/1e6:.2f} × 10^6)")
print()

# 마우스 7마리에 1e5 개씩 넣으려면?
필요 = 7 * 1e5 * 1.3              # 여유 30%
부피 = 필요 / 농도 * 1000          # µl
print(f"7마리 × 10^5 개 (여유 1.3배) = {필요:,.0f} 개")
print(f"→ 현탁액 {부피:.0f} µl 를 덜어 쓰면 된다")
print()

# 세는 오차가 얼마나 번지나
import statistics
sd = statistics.stdev(칸들)
print(f"칸 사이 표준편차 {sd:.1f} → 평균의 오차 약 {sd/len(칸들)**.5/평균:.1%}")
print("칸을 더 세면 오차가 줄지만, 4칸이면 대개 충분합니다.")

High school트리판블루 — 죽은 세포 가려내기

세는 것만으로는 부족합니다. 죽은 세포도 같이 세니까요.

	살아 있는 세포	죽은 세포
세포막	온전함	손상됨
트리판블루	못 들어감	들어가서 파랗게
보이는 모습	투명·밝음	파랑

생존율 = 살아 있는 수 ÷ 전체 수 × 100 — 90% 이상이면 건강합니다.

생존율이 낮으면 그대로 실험하면 안 됩니다. 죽은 세포가 결과를 흐리고, 계산도 어긋나요.

High school세기의 오차를 줄이는 법

규칙	왜
잘 섞은 뒤 즉시 채취	세포가 가라앉음
단일 세포로 풀어 놓기	덩어리는 세기 어려움
칸당 20~50개가 되게 희석	너무 많으면 부정확, 적으면 오차 큼
경계선 규칙을 정하기	위·왼쪽 선에 걸친 것만 센다 등
네 칸 이상 세기	불균일 보정

"1×10⁵ cells"라는 논문의 값은 이 다섯 규칙을 지킨 숫자여야 합니다.

🤔 Check yourself

혈구계산판의 큰 칸 하나에서 세포 50개를 셌습니다. 희석하지 않았다면 농도는?