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Lesson 10 of 20

주형을 지우는 두 방법 — 붓기와 붙박기

[A] RQ1 DNase 10 U 15분 · [B] PES-Pdop-DNase I 막 5분 미만

주형을 지우는 두 방법 — 붓기와 붙박기
같은 효소, 다른 자리. 효소를 어디에 두느냐가 뒤의 모든 걸음을 바꿉니다.

같은 화학입니다 — DNase I 이 DNA 를 자릅니다. 배치가 다릅니다.

[A] 붓는다
반응통에 효소를 넣습니다. 15분. 그리고 그 효소는 산물과 함께 다음 걸음으로 갑니다. 정제에서 또 지워야 합니다.
[B] 붙박는다
막에 고정합니다. 액체가 지나갑니다. 5분 미만. 효소는 제자리에 남습니다. 다섯 번 재사용해도 98%.

차이는 셋입니다.

축붓기붙박기
시간15~30분5분 미만
효소 캐리오버있다 — 뒤에서 지워야 한다없다 — 애초에 안 따라온다
효소 비용배치마다 새로운전 횟수로 나뉜다
고정 효소가 언제나 이기는 것은 아닙니다. 조건을 세어 봅니다.
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효소 값과 재사용 횟수를 밀어 보세요. 어느 조건에서 고정이 이기는지 갈립니다.
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고정 효소 방식의 가장 근본적인 이점은?
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[A]가 고정 효소를 쓰지 않은 것을 어떻게 평가해야 할까요?